Bacteriología

Bacterias que afectan el tracto respiratorio.

Staphylococcus aureus.

La mayoría de las cepas de Staphylococcus son productoras de enzimas (nucleasas, lipasas, hialuronidasas y colagenasa), citotoxinas (hemolisinas), que contribuyen a transformar los tejidos del hospedador en substrato para crecimiento y desarrollo; también son productores de toxinas epidermolíticas y toxinas que conllevan al shock tóxico.

El habitat natural del Staphylococcus  es la piel, fosas nasales y garganta.

Los síndromes clínicos provocados por Staphylococcus aureus son: Infección de piel y partes blandas, neumonía, sialoadenitis, orzuelos, enfermedades por toxinas, meningitis e intoxicación alimentaria.

Para un diagnóstico adecuado de la patología que esta presentando el paciente, se recomienda hacer toma de muestra de: Fluido nasal, moco y fluidos corporales.

Los medios a sembrar son: Agar sangre, primario y caldo tripticasa.

Los medios de identificación son: Gram, catalasa, coagulasa, DNA-asa, novobiocina, API estafilococo y automatizado.

Descripción de las colonias en el medio de cultivo (agar sangre): Colonias redondas, borde irregular, cremosas, blancas o doradas con beta o alfa hemólisis.

Resultados del gram: Cocos gram positivos agrupados en racimos, a veces en cadena o diplococos, no hay formación de esporas.

CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS.

• Fermentación de la glucosa: Positiva.
• Coagulasa: Positivo.
• Catalasa: Positivo.
• DNA-asa: Positivo.
• Temperatura óptima de crecimiento: 30 - 37 grados centígrados. 
• Fermentación del manitol: Positivo.
• Sensibilidad a la novobiocina: Sensible.
• Aerobios y anaerobios facultativos: Anaerobio facultativo positivo.

Antibiograma: Resistente a la penicilina.

Conclusiones: Cocos gram positivos agrupados en racimos, catalasa positivo, su identificación por coagulasa, DNA-asa, novobiociona y métodos automatizados.

Streptococcus pyógenes.

Estreptolisina O y S, estas toxinas que son bases de las propiedades beta hemolíticas, las "O" causa la respuesta inmune y le detección de anticuerpos, mientras que la "S" es capaz de causar lisis de eritrocitos, leucocitos y plaquetas.

El habitat natural del Strepttococcus pyógenes son la piel y las vías aereas superiores.

Los síndromes clínicos provocados por Strepttococcus pyógenes son: Faringitis, traqueitis bacteriana, otitis externa aguda, otitis media, sinusitis, faringoamigdalitis, glomerulonefritis y fiebre reumática.

Para un diagnóstico adecuado de la patología que esta presentando el paciente, se recomienda hacer toma de muestra de: Flujo nasal, amígdalas, oídos, fluidos corporales.

Los medios a sembrar son: Agar sangre y chocolate.

Los medios de identificación son: Gram, catalasa, bacitracina.

Descripción de las colonias: Después de 24 horasde incubación se observan colonias blancas con grandes zonas de beta hemólisis.

Resultados del gram: Cocos gram positivos en parejas y cadenas.

CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS.

• Bacitracina: Sensible.
• Tipo de hemólisis: Beta hemolítico.
• Catalasa: Negativo.
• PYR: Postivo.
• Temperatura óptima de crecimiento: 37 grados centígrados.
• Trimetropim sulfa: Resistente.
• Hipurato de sodio: Negativo.
• CAMP: Negativo.

Antibiograma: Antibióticos S y R.

Conclusiones: El Streptococcus pyógenes es beta hemólitico, gram positivos, inmóviles, no forman esporas, no son productores de catalasa y son bacitracina positiva.

Streptococcus pneumoniae.

Forma parte de la flora bacteriana normal de la mucosa nasal y faríngea.

Los síndromes clínicos provocados por Streptococcus pneumoniae son: Otitis media, sinusitis, neumonía, otitis crónica, bronquitis y meningitis.

Para un diagnóstico adecuado de la patología que esta presentando el paciente, se recomienda hacer toma de muestra de: Esputo, sangre, secreciones bronquiales, aspirado transtraqueal.

Los medios a sembrar son: Agar sangre y agar chocolate.

Los medios de identificación son: Catalasa, gram, bacitracina.

Descripción de las colonias: Colonias redondas, mucosas y no pigmentadas, se rodean de un halo verdoso (alfa hemolítico).

Resultado del gram: Cocos gram positivos agrupados en cadenas cortas y diplococos.

CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS.

• Optoquina: Sensible.
• Tipo de hemólisis: Alfa hemólisis.
• Catalasa: Negativa.
• Solubilidad en sales biliares: soluble a sales biliares.
• Temperatura óptima de crecimiento: 37 grados centígrados.
• Bilis esculina: No hidroliza la bilis esculina.
• Crecimiento en NaCl 6.5%: No hay crecimiento en este tipo de concentración.

Antibiograma: Sensible a la eritromicina, vancomicina y resistente a la tetraciclina.

Conclusiones: Bacteria gram positiva, agrupados en cadena, catalasa negativa con alfa hemólisis, soluble en sales biliares y a la optoquina.

Klebsiella pneumoniae.

Esta bacteria tiene la capacidad de producir enterotoxinas, presenta 2 antigenos en su superficie celular que son los Ags O (polisacarido) y el Ags K (polisacarido capsular), se considera una bacteria antifagocitaria.

El habitat natural de esta bacteria son las mucosas, la nasofaringe y el intestino de los animales.

Los síndromes clínicos provocados por Klebsiella pneumoniae son: Neumonía, abceso pulmonar, enfermedades del tracto urinario e infecciones en tejidos blandos.

Para un diagnóstico adecuado de la patología que esta presentando el paciente, se recomienda hacer toma de muestra de: Esputo, sangre, orina, líquidos y secreciones orgánicas.

Los medios a sembrar son: EMB, XLD, MackConkey, sangre.

Los medios de identificación son: Gram, catalasa, oxidasa, TSI, urea, MIO, LIA, citrato y automatizado.

Descripción de las colonias: Las colonias son de tamaño mediano, borde ondulado, superficie lisa, consistencia mucoide, opaco color morado rojizo.

Resultado al gram: Bacterias gram negativas en forma de bacilos agrupados en cadenas cortas.

CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS.

• TSI y gas: Positivo (A/A+CO2).
• Oxidasa: Negativo.
• Indol: Negativo.
• Movilidad: Negativo.
• Temperatura óptima de crecimiento: 35 grados centígrados.
• Ureasa: Positiva.
• Ornitina: Negativa.
• Arginina y lisina: Negativo/Positivo.

Antibiograma: Resistente a la penicilina y cefalosporina.

Conclusiones: Bacilos gram negativos, fermentador de lactosa, aerobio facultativo, oxidasa negativa, inmóvil, TSI positivo (A/A+CO2).

Acinetobacter baumanii.

Esta bacteria es no fermentador, presenta una cápsula que inhibe la fagocitosis, no es productora de toxinas pero si produce bacteriocinas.

El habitat natural de esta bacteria es: El suelo, aguas contaminadas y se presenta pero en menor frecuencia en piel y mucosas.

Los síndrome clínicos provocados por Acinetobacter baumanii  son: Síndrome miasteniforme, septicemia y neumonía.

Para un diagnóstico adecuado de la patología que esta presentando el paciente, se recomienda hacer toma de muestra de: Esputo, orina, secreciones y líquidos orgánicos.

Los medios a sembrar son: Agar sangre, MackConkey y OF.

Los medios de identificación son: Agar sangre, oxidasa, MIO, TSI, urea, OF y gram.

Descripción de las colonias: Son colonias mucoides y convexas.

Resultado del gram: Se observan diplococos y coco bacilos gram negativos.

CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS.

• Oxidasa: Negativo.
• Catalasa: Positivo.
• Movilidad: Negativa.
• Temperatura óptima de crecimiento: 33 - 35 grados centígrados.
• Ureasa: Negativa.
• Reducción de nitratos: Positiva.
• OF con dextrosa: Negativo.
• Arginina: Positivo.
• Aerobio estricto.

Conclusiones: Diplococos y bacilos gram negativos, no fermentadores de azúcares, aerobios estrictos, inmóviles, catalasa positivo y oxidasa negativo.

Serratia marcenses.

Esta bacteria presenta un antígeno somático (capasz de reproducirse rápidamente) y un antígeno flagelar (que puede estar en condiciones de portador).

Su habitat natural es: El tracto respiratorio alto, tracto urinario bajo y en ambientes y reservorios pobres en nutrientes.

Los síndromes clínicos provocados por Serratia marcenses son: Infecciones nosocomiales, infecciones en el tracto urinario, endocarditis, bacteremia, artritis y queratitis.

Para un diagnóstico adecuado de la patología que esta presentando el paciente, se recomienda hacer toma de muestra de:  Esputo y orina.

Los medios a sembrar son: Agar sangre, XLD, chocolate y MackConkey.

Descripción de las colonias: Colonias brillantes color rojo.

Resultado al gram: Bacilos gram negativos.

CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS.

• Oxidasa: Negativo.
• Indol: Negativo.
• Movilidad: Positivo.
• Temperatura óptima de crecimiento: 35 grados centígrados.
• Arginina y lisina: Positivo.

Antibiograma: Sensible a la cefalexina, clotrimazol; esta bacteria presenta una resistencia innata a las polimixinas y tetraciclinas.

Conclusiones: Microorganismos aerobios gram negativos, su habitat natural es el suelo, son oxidasa negativo y móvilidad positiva.

Pseudomona aeruginosa.

En esta bacteria se encuentran toxinas como exotoxinas "A" y "S", enzimas hidrolíticas que degradan las membranas del tejido conjuntivo de varios órganos.

El habitat de esta bacteria es: El tracto respiratorio, ambientes húmedos y ambientes hospitalarios.

Para un diagnóstico adecuado de la patología que esta presentando el paciente, se recomienda hacer toma de muestra de: Esputo, sangre, líquido cefalorraquídeo.

Los medios a sembrar son: Agar, MackConkey y XLD.

Descripción de las colonias: Son colonias amarillas, redondas, planas, borde irregular, brillo metálico y mucoide.

Resultado al gram: Bacilos gram negativosen forma de bastón, se presentan en forma aislada de manera no esporulada.

CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS.

• TSI: Positivo (K/K).
• Oxidasa: Positiva.
• Movilidad: Positiva.
• Temperatura óptima de crecimiento: 37 - 42 grados centígrados.
• Reducción de nitratos: Positiva.

Conclusiones: Bacilos gram negativos, aerobios, no fermentador, no produce H2S y oxidasa positivo.

Mycobacterium tuberculoso.

Los síndromes clínicos provocados por Mycobacterium tuberculoso son: TBC meninges, TBC  pleural, TBC renal, TBC intestinal, TBC pulmonar.

Para un diagnóstico adecuado de la patología que esta presentando el paciente, se recomienda hacer toma de muestra de: Esputo.

Los medios a sembrar son: Ogawa Kudoh.

Descripción de la colonias: Colonias rugosas, no pigmentadas, pequeñas, redondas, arenosas y confluentes.

Resultado al gram: Bacilos ácido alcohol resistentes.

CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS.

• Catalasa: Positivo.
• Catalasa a temperatura ambiente: Positivo.

Conclusiones: Bacteria aerobia estricta, inmóvil, no esporulados, BAAR, niacina positivo, nitrato positivo y catalasa a temperatura ambiente positivo.

Aislamiento e identificación de bacilos gram negativos tipo enterobacterias y no fermentadoras, patógenos del tracto respiratorio. 

1. Enterobacterias: Oxidasa (-), MackConkey (+).
2. No fermentadores: Oxidasa (+) excepto acinetobacter. No presentan metabolismo oxidativo; generalmente no crecen en MackConkey ( o de crecer lo hacen de una forma muy pobre). Presentan bilis esculina +/-, urea +/-,  lisina y arginina +/-, movilidad +/-, nitratos y nitritos.

¿Qué es OF?

Oxidación fermentación, nos indica el tipo de metabolismo, se usa la glucosa de los sustratos y la transforma en CO2.

Aislamiento e identificación de cocos gram (+) catalasa (+).

Género: Staphylococcus, Micrococcus, Planococcus, Stomatococcus.

Se siembren en agar sangre de 18 - 24 horas.

Son UFC circulares, convexos, cremosos, blancos o dorados y  al gram se observan cocos gram (+) pares, triados y en racimos.

Al hacerle la prueba de coagulasa y ser positiva estamos hablando de bacterias como S. aureus, S. delphini.

Al hacerle la prueba de la novobiocina si el halo es mayor o igual a 16 son sensibles (S. epidermidis, S. warnerii); si el halo es menor a 16 es resistente.

TIPS

En la prueba de la catalasa si es (+) estamos hablando de un Staphylococcus.

En la prueba de la catalasa si es (-) estamos hablando de un Streptococcus.

Cuando las bacterias son tipo betalactamasas, son resistentes a la penicilina, pero cuando son negativas no son resistentes a la penicilina.

En la prueba de novobiocina (agar Mueller) se incuba la muestra a 37 grados centígrados sin CO2 y se hace una siembra masiva y se pone la novobiocina. Si el diametro es de 32mm es sensible, y se informa.

EJ: Staphylococcus sensible a la novobiocina.

Baciloscopia.

La basiloscopia es la búsqueda de BAAR en cualquier espécimen clínico.

El protocolo para la coloración de Ziehl Neelsen es la siguiente:

1. Fucsina (10 minutos).
2. Alcohol etílico (1 minuto).  
3. Azul de bromocresol (2 minutos).

Lectura:

• Negativo: No se observan BAAR en 100 campos.
• Positivo +: Menos de un BAAR en 100 campos observados.
• Positivo ++: De 1 - 10 BAAR en 52 campos observados.
• Positivo +++: Más de 10 BAAR en 20 campos observados. 

Calculo para hacer el recuento de BAAR:

Sumatoria de campos/100= Bacilos positivos.

Cultivo de mycobacterias.

Las micobacterias se siembran en agar Ogawa Kudoh, Lowenstein Jensen y Stonebrink.

Estos agares son preparados son sustancias de huevo, solución de sales y glicerina para fuente de carbono.

Formas de conservar la muestra.

• Fosfato trisódico al 10%: Mantiene viable la mycobacterias.
• Fosfato trisódico al 20%: Para la orina.
• Fosfato trisódico 10cm al 20%: Para 30cm de orina.  

Para los lectores que quieran profundizar en los temas estudiados, les dejamos una reseña bibliográfica que les permita un mejor estudio y entendimiento.

1. Murray P. Microbiología Médica. Quinta edición. 2006.
2. Nester E. Microbiología humana. Manual moderno. 2007.
3. Peters W. Atlas de medicina tropical y parasitología. Sexta edición. 2008.
4. Restrepo A. Fundamentos de medicina. Enfermedades infecciosas, sexta edición. Medellín, 2003. 

Microbiología y bioanalismo.